Detecção do vírus herpes simples por reação em cadeia da polimerase em pacientes com ceratite herpética típica ou atípica / Molecular detection of herpes simplex virus by polymerase chain reaction in patients with typical and atypical herpetic keratitis

OBJETIVO: Avaliação dos pacientes com o quadro clínico de ceratite herpética (CH) típicas e atípicas, pela reação em cadeia da polimerase (PCR) correlacionando com o diagnóstico clínico. MÉTODOS: Foi realizada a PCR em 28 pacientes com ceratite herpética típica e atípica. RESULTADOS: A PCR foi positiva em 57,14 por cento (n=16) do total (n=28). Nos casos de CH típica a positividade foi de 60,00 por cento (n=12) em 20 casos. Para CH epitelial a positividade foi de 69,23 por cento (n=9), sendo 77,78 por cento (n=7) apenas para as lesões epiteliais dendríticas. Os casos de CH atípica apresentaram positividade de 50 por cento (n=4) em oito casos. CONCLUSÃO: Quadro clínico típico de CH teve boa correlação com o resultado positivo observado na PCR. Entretanto, metade dos pacientes com o quadro de CH atípica apresentou PCR positivo, portanto, o exame do PCR é teste importante para o auxílio e diagnóstico da CH. No caso de CH estromal, foi demonstrado que a técnica da PCR conseguiu identificar o vírus HSV.

PURPOSE: To evaluate patients with clinically typical and atypical herpetic keratitis (HK) by means of polymerase chain reaction (PCR) as compared with the clinical diagnosis. METHODS: PCR in 28 patients with clinical symptoms of typical and atypical HK was performed. RESULTS: PCR was positive in 57.14 percent (n=16) of the total cases (n=28). The test was positive in 60.0 percent (n=12) of the 20 typical HK cases. For epithelial HK, the test was positive in 69.23 percent (n=9), and 77.78 percent (n=7) only for dendritic injuries. Atypical HK presented a positive test in 50 percent (n=4) of eight cases. CONCLUSION: Clinical typical picture of HK had a good correlation with the positive result of PCR, mainly for epithelial injury of the dendritic type. However, 50 percent of the patients with atypical HK presented positive PCR. This result showed that PCR test can provide an effective HK diagnosis. In the stromal case of HK, PCR was a useful technique to identify HSV virus.

Estudio clínico y virológico en un grupo de niños chilenos con herpes ocular: análisis genómico de las cepas / Clinical-virological study in chilean children with ocular herpes: genomic analysis of strains

Objetivo: Caracterizar el diagnóstico de infección ocular por virus herpes simples (HSV) en un grupo de niños chilenos, mediante el estudio clínico y de laboratorio virológico. Métodos: La población estudiada comprendió niños menores de 15 años, con diagnóstico clínico de herpes ocular, que fueron atendidos por los autores y un grupo de oftalmólogos entrenados especialmente para el estudio. Junto con detallar el tipo de infección herpética, a todos los pacientes se les tomaron muestra para estudio virológico que incluyó estudio de cultivos celulares y posteriormente técnica de reacción en cadena de polimerasa (PCR), con el fin de tipificar las cepas y características genómicas del virus infectante. Resultados: El estudio enroló 18 niños, cuyas edades fluctuaron entre los 40 días y 13 años, con una media de 6 años. De las formas clínicas observadas, la más frecuentes fueron la blefaritis y la queratitis dendrítica constituyendo en 27 y 22 por ciento de los casos, respectivamente. El diagnóstico de HSV fue confirmado en 15 de 18 pacientes, constituyendo un 83 por ciento de positividad. 14 de 15 casos correspondieron a HSV tipo 1, y en un niño se diagnóstico infección por HSV tipo 2. Los antecedentes clínicos de este caso confirmaron que se trataba de una infección perinatal, lo que permitió instaurar el tratamiento en forma oportuna. El estudio permitió identificar un caso de excreción ocular viral asintomática, lo que sumando a un cuadro de recurrencias múltiples obligó a indicar terapia profiláctica permanente con aciclovir. Conclusiones: La blefaritis y queratitis herpética constituyeron en conjunto el 70 por ciento de los casos. El rendimiento celular y PCR fue elevado en los casos con alto índice de replicación viral, como la queratitis y blefaritis. En los casos con menor replicación, como queratitis estromal o conjuntivitis, el estudio PCR demostró una mayor sensibilidad que el estudio en cultivo celular. La presencia de un caso de infección perinatal por HSV-2 pudiera ser indicativo de un aumento en la frecuencia de esta forma de presentación.

Rol del virus herpes simplex en la queratitis inmune estromal / Role of herpes simplex virus in the immune stromal keratitis

Background: Herpes simplex virus (HSV) infection of the cornea is a leading cause of blindness in occidental countries and a common recurrent manifestation of it is the immune stromal keratitis (ISK). However, it is not known whether active viral replication occurs during the acute phase of the disease, because isolation of the virus by conventional culture techniques has not been accomplished. Aim: To establish the presence of HSV in patients with ISK. Material and methods : Fourteen corneal swabbing samples, from active diseased eyes of patients with clinical diagnosis of ISK, were submitted to Herpchek© and PCR for the identification of HSV antigens and genome. Results: All ISK samples were negative by both techniques. Conclusions : It was not possible to identify HSV antigens nor their genome by the methodology used. It is likely that, they can't be detected in corneal superficial layers or probably there is no viral replication at this stage of the disease, so antiviral therapy should be reconsidered

Human herpesvirus type 6 in human corneas

Fifty six corneas from normal individuals and twenty-five corneas from patients with confirmed herpes simplex virus type 1 [HSV-1] keratitis were analyzed using the polymerase chain reaction test for the absence or presence of human herpesvirus type 6 [HHV-6] DNA sequences. Fifty% of the corneas from the normal donors and 25% of the corneas from the HSV-1 keratitis patients were found positive for HHV-6 DNA sequences. The significance of the presence of HHV-6 in the corneas of the keratitis patients is discussed

Estudio clínico virológico en un grupo de niños chilenos con herpes ocular: análisis genómico de las cepas / Clinic-virological study in chilean children with ocular herpes: genomic analysis of strains

Se estudiaron todos los niños menores de 15 años, con diagnóstico clínico de herpes ocular, efectuado por oftalmólogos de servicios oftalmológicos de la Facultad de Medicina de la Universidad de Chile y de un centro oftalmológico privado, desde abril de 1995 a abril de 1996, en Santiago de Chile. Se consignó información clínico epidemiológica, examen clínico y se obtuvieron mediante torulado muestras de conjuntiva y/o córnea del ojo afectado, conjuntiva del ojo sano y mucosa oral, utilizando una técnica estándar. Se efectuó aislamiento viral en células VERO (ATCCL81). En caso de detectarse efecto citopático, el aislado viral se propagó y almacenó para su estudio. Se efectuó identificación y tipificación viral con anticuerpos tipo específicos marcados con fluoresceína (DAKO). Se efectuó amplificación génica y análisis con enzimas de restricción. Resultados: se determinó que 14/15 aislados correspondían a herpes simplex tipo I (HSV-I) y uno a HSV-2, el cual muy probablemente correspondió a una infección perinatal por este virus. Las cepas de HSV-I presentaron patrones genómicos distintos entre sí y con la cepa de referencia norteamericana HSV-IF. La forma de presentación más frecuente fue de blefaritis herpética, seguida por la dendrita corneal, tanto en el primer espisodio clínico como en las recurrencias y en estas últimas, tiende a presentarse la misma forma clínica. La tasa de recurrencia es mayor que en la población adulta. La infección fue unilateral con la excepción de un caso con distintas formas de presentación en cada ojo y aislamiento simultáneo bilateral. En dos casos fue posible detectar excreción oral del virus subclínica